DNase I (Rnase-fri) (2u/ul)
Kat. nr.: HC4007B
DNase I er en endonuklease, der kan fordøje enkelt- eller dobbeltstrenget DNA.Det kan hydrolysere phosphodiesterbindinger for at producere mono- og oligodeoxynukleotider, der indeholder en 5'-phosphatgruppe og en 3'-OH-gruppe.Det optimale pH-område for DNase I er 7-8.Aktiviteten af DNase I afhænger af Ca2+og kan aktiveres af divalente metalioner såsom CO2, Mn2+Zn2+osv. I nærværelse af Mg2+DNase I kan tilfældigt spalte et hvilket som helst sted af dobbeltstrenget DNA;Mens i nærværelse af Mn2+DNase I kan spalte DNA dobbeltstrenget på det samme sted, hvilket danner stumpe ender eller klæbrige ender med 1-2 nukleotider udstående.Det kan bruges til behandling af forskellige RNA-prøver.
Komponenter
| Navn | 1KU | 5KU |
| Rekombinant DNaseI (RNase-fri) | 500 μL | 5 × 500 μL |
| DNase I-reaktionsbuffer (10×) | 1 ml | 5 x 1 ml |
Opbevaringsforhold
Dette produkt skal opbevares ved -25~-15 ℃ i 2 år.Undgå venligst gentagen frysning-optøning.
Instruktioner
Anvendes kun til fjernelse af DNA fra RNA-prøver til reference.
1. Brug venligst RNase-fri centrifugerør og pipettespidser til at forberede følgende reaktionssystem:
| Komponenter | Volumen (μL) |
| DNase I-reaktionsbuffer (10×) | 1 |
| Rekombinant DNasel (RNase-fri) | 1 |
| RNA | X |
| RNase-fri ddH2O | Op til 10 |
2. Reaktionsbetingelserne er som følger: 37 ℃, tilsæt efter 15-30 minutter en slutkoncentration på 2,5 mM EDTA-opløsning og bland godt, derefter 65 ℃ i 10 minutter.Den behandlede skabelon kan bruges til efterfølgende RT-PCR- eller RT-qPCR-eksperimenter osv.
Noter
1. DNase 1 er følsom over for fysisk denaturering;Ved blanding vend forsigtigt reagensglasset ogryst godt, ryst ikke kraftigt.
2. Enzymet skal opbevares i en isboks eller på et isbad, når det bruges, og skal opbevares ved -20℃ umiddelbart efter brug.
3. Dette produkt er kun til forskningsbrug.
4. Betjen venligst med laboratoriefrakker og engangshandsker, for din sikkerhed.
