Ultra Nuclease GMP-kvalitet
Kat. nr.: HC2016A
UltraNuclease GMP-kvalitet udtrykkes og renses i Escherichia coli (E.coli) ved gensplejsning og fremstillet under GMP-miljøer.Det kan reducere viskositeten af cellesupernatant og cellelysat i videnskabelig forskning, øge proteinrensningseffektiviteten og forbedre proteinfunktionel forskning.Produktet kan også reducere værtsnukleinsyrerester til pg-grad, hvilket forbedrer ydeevnen og sikkerheden af biologiske produkter til applikationer, herunder virusoprensning, vaccinefremstilling og protein/polysaccharid farmaceutisk fremstilling.Derudover kan produktet også anvendes til at forhindre sammenklumpning af humane perifere mononukleære blodceller (PBMC) i celleterapi og vaccineudvikling.
UltraNuclease leveres i form af et steriliseret reagens, elueret i buffer (20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50 % glycerin), med udseende som en farveløs, gennemsigtig væske.Dette produkt er fremstillet efter GMP-proceskrav og leveres i flydende form.
Komponenter
UltraNuclease GMP-kvalitet (250 U/μL)
Opbevaringsbetingelser
Produktet sendes med tøris og kan opbevares ved -25℃~-15°C i to år.
Hvis produktet er åbnet og har været opbevaret ved 4℃ i mere end en uge, anbefaler vi filtreringproduktet for at forhindre mikrobiel kontaminering.
specifikationer
| Udtryksvært | Rekombinant E. coli med UltraNuclease-gen |
| Molekylær vægt | 26,5 kDa |
| soelektrisk punkt | 6,85 |
| Renhed | ≥99 % (SDS-SIDE) |
| Opbevaringsbuffer | 20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50 % glycerin |
|
Enhedsdefinition | Definitionen af en aktivitetsenhed (U) er den mængde enzym, der bruges tilændre absorptionsværdien af ΔA260 med 1,0 på 30 minutter i en 2,625 mlreaktionssystem ved 37 ℃ med en pH på 8,0 (svarende til fuldstændig fordøjelse af37 μg laksesæd DNA til oligonukleotider). |
Instruktioner
1. Prøve Kollektion
Vedhæftende celler: fjern mediet, vask cellerne med PBS, og fjern supernatanten.
Suspensionsceller: opsaml cellerne ved centrifugering, vask cellerne med PBS, centrifuger ved 6.000rpm i 10 min., saml pelleten.
Escherichia coli: opsaml bakterierne ved centrifugering, vask én gang med PBS, centrifuger ved 8.000rpm i 5 min, og opsaml pelleten.
2. Prøvebehandling
Behandl de opsamlede cellepelleter med lysisbuffer i forholdet mellem masse(g) og volumen(mL)1:(10-20), eller ved mekaniske eller kemiske metoder på is eller ved stuetemperatur (1g cellepellet indeholder ca.
109 celler).
3. Enzymbehandling
Tilsæt 1-5mM MgCl til reaktionssystemet og juster pH til 8-9.
Tilsæt UltraNuclease i forhold til 250 enheder for at fordøje 1 g cellepelleter, inkuber ved 37 ℃ i mere end 30 minutter.Se venligst formularen "Anbefalet reaktionstid" for at vælgebehandlingens varighed.
4. Supernatant Kollektion
Centrifuger ved 12.000 rpm i 30 minutter og opsaml supernatanten.
Bemærk: Hvis opløsningen er sur eller basisk eller indeholder høje koncentrationer af salt, rengøringsmidler ellerdenatureringsmidler, bedes du øge enzymdoseringen eller forlænge behandlingstiden tilsvarende.
Anbefalede reaktionsbetingelserons
| Parameter | Optimal tilstand | Effektiv tilstand |
| Mg²+Koncentration | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Temperatur | 37℃ | 0-42℃ |
| DTT-koncentration | 0-100 mM | >0 mM |
| Mercaptoethanol Koncentration | 0-100 mM | >0 mM |
| Monovalent kationkoncentration | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Fosfat lon Koncentration | 0-10 mM | 0-100 mM |
Anbefalede Reaktion Tid (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8,0)
| UltraNuclease-mængde (endelig koncentration) | Reaktionstid |
| 0,25 U/ml | >10 timer |
| 2,5 U/ml | >4 timer |
| 25 U/ml | 30 min |
Bemærkninger:
Bær venligst det nødvendige PPE, såsom laboratoriefrakke og handsker, for at sikre din sundhed og sikkerhed!
