Alkalisk fosfatase (ALP)

Alkalisk fosfatase er afledt af en rekombinant E. coli-stamme, der bærer TAB5-genet.Enzymet katalyserer dephosphoryleringen af ​​5´- og 3´-ender af DNA- og RNA-phosphomonoestere.Det hydrolyserer også ribose såvel som deoxyribonukleosidtriphosphater (NTP'er og dNTP'er).TAB5 Alkaline Phosphatase virker på 5' udragende, 5' forsænkede og stumpe ender.Phosphatasen kan bruges i mange molekylærbiologiske anvendelser, såsom kloning eller probeendemærkning for at fjerne de phosphorylerede ender af DNA eller RNA.I kloningseksperimenter forhindrer dephosphorylering det lineariserede plasmid-DNA i selvligering.Det kan også nedbryde ikke-inkorporerede dNTP'er i PCR-reaktioner for at forberede en skabelon til DNA-sekventering.Enzymet inaktiveres fuldstændigt og irreversibelt ved opvarmning til 70°C i 5 minutter, hvorved fjernelse af fosfatasen før ligering eller slutmærkning unødvendig.