2×PCR Master Mix (uden farvestof)
PCR Master Mix er en slags konventionel PCR forblandet opløsning, som er klar til brug, inklusive Taq DNA Polymerase, dNTP mix MgCl2 og optimeret buffer.Under reaktionen kan kun primeren og skabelonen tilføjes til amplifikation, hvilket i høj grad forenkler eksperimentets operationstrinn.Dette produkt indeholder fremragende stabilisatorer og kan opbevares i 3 måneder ved 4 ℃.PCR-produktet har 3'-dA-fremspring og kan let klones ind i T-vektor.
Opbevaringsbetingelser
Produktet skal opbevares ved -25℃~ -15℃ i to år.
specifikationer
Fidelity (vs. Taq) | 1× |
Hot Start | No |
Overhæng | 3′-A |
Polymerase | Taq DNA polymerase |
Reaktionsformat | SuperMix eller Master Mix |
Reaktionshastighed | Standard |
produkttype | PCR Master Mix (2×) |
Instruktioner
1.Reaktionssystem
Komponenter | Størrelse (μL) |
Skabelon DNA | Egnet |
Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
PCR Master Mix | 25 |
ddH2O | Til 50 |
2.Amplifikationsprotokol
Cykle trin | Temperatur (°C) | Tid | Cykler |
Præ-denaturering | 94 ℃ | 5 min | 1 |
Denaturering | 94 ℃ | 30 sek | 35 |
Udglødning | 50-60 ℃ | 30 sek | |
Udvidelse | 72 ℃ | 30-60 sek/kb | |
Endelig udvidelse | 72 ℃ | 10 min | 1 |
Bemærkninger:
1) Skabelonbrug: 50-200 ng genomisk DNA;0,1-10 ng plasmid DNA.
2) Mg2+koncentration: Dette produkt indeholder 3 mM MgCl2 egnet til de fleste PCR-reaktioner.
3) Udglødningstemperatur: Se venligst den teoretiske Tm-værdi for Primere.Udglødningstemperaturen kan indstilles til 2-5 ℃ lavere end den teoretiske værdi af primeren.
4) Forlængelsestid: Til molekylær identifikation anbefales 30 sek/kb.Til genkloning, 60sek/kb anbefales.
Noter
1.For din sikkerhed og sundhed skal du bære laboratoriefrakker og engangshandsker til betjening.
2.Kun til forskningsbrug!