Fosfatase Alkaline (ALP)
Beskrivelse
Alkalisk fosfatase er afledt af en rekombinant E. coli-stamme, der bærer TAB5-genet.Enzymet katalyserer dephosphoryleringen af 5´- og 3´-ender af DNA- og RNA-phosphomonoestere.Det hydrolyserer også ribose såvel som deoxyribonukleosidtriphosphater (NTP'er og dNTP'er).TAB5 Alkaline Phosphatase virker på 5' udragende, 5' forsænkede og stumpe ender.Phosphatasen kan bruges i mange molekylærbiologiske anvendelser, såsom kloning eller probeendemærkning for at fjerne de phosphorylerede ender af DNA eller RNA.I kloningseksperimenter forhindrer dephosphorylering det lineariserede plasmid-DNA i selvligering.Det kan også nedbryde ikke-inkorporerede dNTP'er i PCR-reaktioner for at forberede en skabelon til DNA-sekventering.Enzymet inaktiveres fuldstændigt og irreversibelt ved opvarmning til 70°C i 5 minutter, hvilket gør fjernelse af fosfatasen før ligering eller slutmærkning unødvendig
Brug
1.Alkalisk phosphatase koblet til proteiner (antistoffer, streptavidin osv.) kan specifikt identificere målmolekyler og kan bruges i ELISA, WB og histokemisk detektion;
2.Alkalisk phosphatase kan bruges til at dephosphorisere 5'-terminalen af DNA eller RNA for at forhindre selvbinding;
3. Ovenstående dephosphorylerede DNA eller RNA kan mærkes med radiomærkede fosfater (via T4 polynukleotidkinase)
Kemisk struktur
Specifikation
Test genstande | specifikationer |
Enzym aktivitet | 5U/μL |
Endonuklease aktivitet | Ikke fundet |
Exonuuklease aktivitet | Ikke fundet |
Nicking aktivitet | Ikke fundet |
RNase aktivitet | Ikke fundet |
E. coli DNA | ≤1 kopi/5U |
Endotoksin | LAL-test, ≤10EU/mg |
Renhed | ≥95 % |
Transport og opbevaring
Transport:AmbIent
Opbevaring:Opbevares ved 2-8°C
Anbefalet gentestLiv:2 år