Peroxidase (peberrodskilde) Synonym: Hydrogenperoxidoxidoreduktase;HRP
Beskrivelse
Peberrodsperoxidase (HRP) er isoleret fra rødderne af peberrod (Amoracia rusticana) og tilhører ferroprotoporphyringruppen af peroxidaser.HRP kombineres let med hydrogenperoxid (H2O2).Det resulterende [HRP-H2O2]-kompleks kan oxidere en lang række forskellige hydrogendonorer:
Donor + H2O2 → Oxideret Donor + 2 H2O
HRP vil oxidere forskellige substrater (se tabel 1):
• Kromogent
• Kemiluminescerende (såsom luminol eller isoluminol)
• Fluorogen (såsom tyramin, homovanillinsyre eller 4-hydroxyphenyleddikesyre)
HRP er et enkeltkædet polypeptid, der indeholder fire disulfidbroer.HRP er et glykoprotein, der indeholder 18% kulhydrat.Kulhydratsammensætningen består af galactose, arabinose, xylose, fucose, mannose, mannosamin og galactosamin, afhængigt af det specifikke isozym.
HRP er et meget brugt mærke for immunoglobuliner i mange forskellige immunokemiapplikationer, herunder immunoblotting, immunhistokemi og ELISA.HRP kan konjugeres til antistoffer ved flere forskellige metoder, herunder glutaraldehyd, periodatoxidation, gennem disulfidbindinger og også via amino- og thiol-rettede tværbindere.HRP er det mest ønskede mærke for antistoffer, da det er det mindste og mest stabile af de tre mest populære enzymmærker (peroxidase, β-galactosidase, alkalisk phosphatase), og dets glycosylering fører til lavere ikke-specifik binding.En gennemgang af glutaraldehyd- og periodatkonjugationsmetoder er blevet offentliggjort.
Peroxidase anvendes også til bestemmelse af glucose4 og peroxider i opløsning.Adskillige publikationer, 6-24 afhandlinger, 25-29 og afhandlinger 30-46 har citeret brug af P8375 i deres forskningsprotokoller.
Kemisk struktur
Specifikation
Test genstande | specifikationer |
Beskrivelse | Rødbrunt amorft pulver, lyofiliseret |
Aktivitet | ≥100U/mg |
Renhed (SDS-SIDE) | ≥90 % |
Opløselighed (10mg pulver/ml) | Klar |
Forurenende enzymer | |
NADH/NADPH oxidase | ≤0,1 % |
Catalase | ≤0,005 % |
ATPase | ≤0,03 % |
Transport og opbevaring
Transport:Sendes under 2-8°C
Opbevaring:Opbevares ved -20°C (lang sigt), 2-8°C (kort sigt)
Anbefalet gentestLiv:2 år