Bst 2.0 DNA-polymerase (glycerolfri, høj densitet)
Bst DNA-polymerase V2 er afledt af Bacillus stearothermophilus DNA-polymerase I, som har 5'→3' DNA-polymeraseaktivitet og stærk kædeerstatningsaktivitet, men ingen 5'→3'-exonukleaseaktivitet.Bst DNA Polymerase V2 er ideelt egnet til strengforskydning, isotermisk amplifikation LAMP (Loop-medieret isotermisk amplifikation) og hurtig sekventering.Denne Bst DNA-polymerase V2 er i stand til at hæmme DNA-polymeraseaktivitet ved stuetemperatur, så den kan betjenes, og reaktionssystemet kan formuleres ved stuetemperatur, hvilket forhindrer uspecifik amplifikation og forbedrer reaktionens effektivitet, og denne version kan blive lyofiliseret.Derudover er den i stand til at frigive sin aktivitet ved forhøjede temperaturer, hvilket eliminerer behovet for et separat aktiveringstrin.
Komponenter
Komponent | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
Bst DNA polymerase V2 (glycerolfri) (32U/μL) | 0,05 ml | 0,25 ml | 2,5 ml |
10×HC Bst V2 buffer | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 3×10 ml |
MgSO4 (100 mm) | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 2×10 ml |
Ansøgninger
1.LAMP isotermisk amplifikation
2.DNA-streng enkelt forskydningsreaktion
3.Høj GC-gensekventering
4.DNA-sekventering af nanogramniveau.
Opbevaringstilstand
Transport under 0°C og opbevares ved -25°C~-15°C.
Enhedsdefinition
En enhed er defineret som mængden af enzym, der inkorporerer 25 nmol dNTP i syreuopløseligt materiale på 30 minutter ved 65°C.
LAMPEREaktion
Komponenter | 25 μLSystem |
10×HC Bst V2 buffer | 2,5 μL |
MgSO4 (100 mm) | 1,5 μL |
dNTP'er (10 mM hver) | 3,5 μL |
SYTO™ 16 Grøn (25×)a | 1,0 μL |
Primer blandingb | 6 μL |
Bst DNA-polymerase V2 (glycerolfri) (32 U/uL) | 0,25 μL |
Skabelon | × μL |
ddH2O | Op til 25 μL |
Bemærkninger:
1) a.SYTOTM 16 Grøn (25×): I henhold til eksperimentelle behov kan andre farvestoffer anvendes som erstatninger;
2) b.Primerblanding: opnået ved at blande 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2,5 µM F3, 2,5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB og andre volumener.
Reaktion og Tilstand
1 × HC Bst V2-buffer, inkubationstemperaturen er mellem 60°C og 65°C.
Varme inaktivering
80°C, 20 min.